inhibición de prostaciclina por la indometacina agrava el daño hepático y encefalopatía en ratas … – europa artículo PMC – europa reflejos pmc convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto

Se han propuesto vasodilatación y aumento de la permeabilidad capilar de estar involucrados en la patogénesis de forma aguda y crónica de la encefalopatía hepática. La prostaciclina (PGI2) y el óxido nítrico (NO) son contribuyentes importantes a la circulación hiperdinámica en estados hipertensión portal. Nuestro estudio anterior mostró que la inhibición crónica de NO tuvo efectos perjudiciales sobre la gravedad de la encefalopatía en tioacetamida (TAA)-ratas tratadas debido a la agravación de daño hepático. Hasta la fecha, no hay se utilizaron los datos detallados relativos a los efectos de la inhibición PGI2 de la gravedad de la encefalopatía hepática durante ratas Sprague-Dawley failure.Male hepática fulminante que pesaban 300-350 g.


insuficiencia hepática fulminante se indujo por inyección intraperitoneal de TAA (350 mg / (kg.d) durante 3 d.Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto las ratas se dividieron en dos grupos para recibir la inyección intraperitoneal de la indometacina (5 mg / (kg.d), n = 20) o solución salina normal (N / S, n = 20) durante 5 d, a partir de 2 d antes de la administración TAA. Gravedad de la encefalopatía se evaluó mediante el recuento de la actividad motora medidos con metro actividad animal opto-Varimex. Plasma factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alfa, un índice de lesión hepática) y 6-ceto-PGF (1 alfa) (un metabolito de PGI2) niveles se midieron por assay.As de inmunoabsorción ligados a enzimas en comparación con N / S tratada ratas, la tasa de mortalidad fue significativamente mayor en ratas que recibieron indometacina (20% vs 5%, P0.05), en comparación con ratas tratadas con N administración de indometacina / S.Chronic tiene efectos perjudiciales sobre la gravedad de la encefalopatía en ratas tratadas-TAA y este fenómeno puede atribuirse a la agravación de la lesión hepática.Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto este estudio sugiere que la PGI2 puede proporcionar un papel protector en el desarrollo de insuficiencia hepática fulminante.

AIM: vasodilatación y aumento de la permeabilidad capilar se han propuesto estar involucrados en la patogénesis de forma aguda y crónica de la encefalopatía hepática. La prostaciclina (PGI 2) y el óxido nítrico (NO) son contribuyentes importantes a la circulación hiperdinámica en estados hipertensión portal. Nuestro estudio anterior mostró que la inhibición crónica de NO tuvo efectos perjudiciales sobre la gravedad de la encefalopatía en tioacetamida (TAA)-ratas tratadas debido a la agravación de daño hepático. Hasta la fecha, no hay datos detallados relativos a los efectos de la PGI 2 inhibición de la gravedad de la encefalopatía hepática durante fulminantes hepáticas convulsiones anóxicas failure.Reflex vs espasmos sosteniendo

Se utilizaron ratas Sprague-Dawley macho que pesaban 300-350 g: métodos. insuficiencia hepática fulminante se indujo por inyección intraperitoneal de TAA (350 mg / (kg.d) durante 3 d. Las ratas se dividieron en dos grupos para recibir la inyección intraperitoneal de la indometacina (5 mg / (kg.d), n = 20) o solución salina normal (N / S, n = 20) durante 5 d, a partir de 2 d antes de la administración TAA. gravedad de la encefalopatía se evaluó mediante el recuento de la actividad motora medidos con opto-Varimex metros actividad animal. plasma factor de necrosis tumoral-α (TNF -α, un índice de lesión hepática) y 1α 6-ceto-PGF (un metabolito de la PGI 2) niveles se midieron por ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas.

RESULTADOS: en comparación con las ratas tratadas con S N /, la tasa de mortalidad fue significativamente mayor en ratas que recibieron indometacina (20% vs 5%, P0.05), en comparación con ratas tratadas con N / S.Reflex convulsiones anóxicas vs aliento que sostiene hechizos

CONCLUSIÓN: crónica administración de indometacina tiene efectos perjudiciales sobre la gravedad de la encefalopatía en ratas tratadas-TAA y este fenómeno puede atribuirse a la agravación de la lesión hepática. Este estudio sugiere que la PGI2 puede proporcionar un papel protector en el desarrollo de insuficiencia hepática fulminante.

INTRODUCCIÓN

La encefalopatía hepática es un síndrome neuropsiquiátrico asociado con insuficiencia hepática aguda, enfermedad hepática parenquimatosa crónica, o portal-sistémica anastomosis [1- 3]. El espectro de los síntomas puede variar de cambios mentales sutiles o un ritmo circadiano alterado a un coma hepático. La patogenia de la encefalopatía hepática no se ha establecido plenamente y una delineación de los factores patogénicos para la encefalopatía hepática, así como modalidades terapéuticas en desarrollo, están garantizados altamente today.Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto

circulación hiperdinámica observada en la hipertensión portal se caracteriza por vasodilatación pronunciada, el aumento de los flujos sanguíneos sistémicos y regionales, y aumentada índice cardíaco [4]. Se han propuesto vasodilatación y aumento de la permeabilidad capilar de estar involucrados en la patogénesis de forma aguda y crónica de la encefalopatía hepática [5- 8]. Estudios recientes demostraron que la formación excesiva de óxido nítrico (NO) y la prostaciclina (PGI 2), los vasodilatadores endógenos sintetizados por el endotelio vascular [9], son importantes contribuyentes a la circulación hiperdinámica [10- 13]. Nuestro estudio reciente [14] demostraron que la inhibición crónica de NO tuvo efectos perjudiciales sobre la gravedad de la encefalopatía en tioacetamida (TAA) ratas tratadas debido a la agravación de daños en el hígado, lo que sugiere un papel protector para el NO en el desarrollo de encefalopatía hepática.Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto sobre la relación entre las prostaglandinas y el hígado, algunos estudios sugieren que las prostaglandinas podrían proteger el hígado contra el daño por una amplia variedad de toxinas (tetracloruro de carbono, acetaminofeno, galactosamina, alcohol), hipoxia, isquemia, y el daño inmunológico [15- 23] aunque los mecanismos no están claros. Hasta la fecha, no hay datos detallados relativos a los efectos de la PGI 2 inhibición de la gravedad de la encefalopatía hepática durante la condición de insuficiencia hepática fulminante.

El objetivo de este estudio fue investigar los efectos de la indometacina, un inhibidor de la PGI 2 [24], de la gravedad de la encefalopatía en ratas con insuficiencia hepática fulminante inducida por TAA [25- 27]. Para la cuantificación más exacta del grado de encefalopatía hepática, se midieron las actividades motoras de ratas en cajas de campo abierto automatizados equipados con células de infrarrojos [28- 30].Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto los niveles plasmáticos de factor de necrosis tumoral-α (TNF-α, un índice de lesión del hígado), 6-ceto-prostaglandina F 1α (6-ceto PGF 1a un metabolito de la PGI 2), aminotransferasa (ALT), bilirrubina total, y también se determinó la creatinina.

modelo animal

Se utilizaron ratas Sprague-Dawley con un peso de 300-350 g. insuficiencia hepática fulminante se indujo por inyección intraperitoneal de TAA (350 mg / (kg.d) en solución salina normal, Sigma chemical co, St. Louis, MO, EE.UU.) durante 3 días consecutivos. Las ratas se dividieron en dos grupos para recibir la inyección intraperitoneal de la indometacina (5 mg / (kg.d), n = 20) [24] o placebo (solución salina normal, N / S, n = 20) a partir de dos días antes de la partida de la administración TAA y se prolongó durante 5 d. Para evitar la hipoglucemia y desequilibrio de electrolitos, las inyecciones subcutáneas de una solución que contiene agua con glucosa 10% mezclados con lactato de Ringer (25 ml / kg) se realizó cada 12 h después de la primera inyección de TAA [31] .Reflex convulsiones anóxicas vs respiración de mantenimiento del motor hechizos mediciones de la actividad y la recogida de muestras de sangre se realizaron 3 d después de la primera administración de TAA. Todas las ratas se enjaularon a 24 ° C con un ciclo de luz-oscuridad de 12 h y se les permitió libre acceso a agua y comida. Los experimentos aquí se llevaron a cabo de acuerdo con los principios de la sociedad guiar Fisiológica Americana para el cuidado y uso de animales de laboratorio.

Medición de la Actividad Física

actividades motoras en un campo abierto se determinaron usando el opto-Varimex metros actividad animal (instrumentos columbus inc., Columbus, OH, EE.UU.) [28- 30]. Los sensores de actividad opto-VARIMEX utilizan de alta intensidad, los haces de luz infrarroja modulada para detectar el movimiento animal. Los animales fueron alojados en jaulas transparentes (17 pulgadas x 17 pulgadas x 8 pulgadas) por las que pasan los 30 rayos infrarrojos en el plano horizontal, 15 en cada uno axis.Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos celebración de este dispositivo se diferencia movimientos no ambulatorios (arañazos, roer ) desde la deambulación sobre la base de la interrupción consecutiva de los rayos infrarrojos de vigilancia. Una fila adicional de rayos infrarrojos en el plano horizontal (15 en cada eje) a unos 10 cm por encima del suelo se utiliza para contar los movimientos verticales. Durante las mediciones de la actividad, los animales no tuvieron acceso a alimento o pienso. Se realizaron todos los estudios en condiciones estrictamente estandarizadas en el cuarto oscuro durante 30 minutos. El número de movimientos totales, movimientos ambulatorios, y los movimientos verticales se registró por separado para reflejar las actividades motoras de ratas con insuficiencia hepática fulminante.

Determinación de plasma TNF-α, 6-ceto-PGF 1α, ALT, bilirrubina total y creatinina

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Después de que la piel abdominal se limpió dos veces con tintura de yodo y 70% de alcohol, se abrió el abdomen usando una técnica estéril. Se recogió un 3 ml de muestra de sangre de la vena cava inferior en una jeringa libre de pirógenos que contiene 75 unidades de heparina de sodio, luego se colocan en un baño de hielo y se transportaron inmediatamente al laboratorio. El plasma se centrifugó a 4 ° C y 2935 g durante 10 min, después se almacenó a -70 ° C en tubos de polietileno libres de pirógenos para el análisis posterior dentro de 6 semanas.

Se midió TNF-α niveles en plasma [32] con un comercialmente disponibles de sándwich en fase sólida unidos a enzimas ensayo inmunoenzimático (kits TNF-alfa de rata; sistemas Rd, Minneapolis, MN, EE.UU.) de acuerdo con el protocolo suministrado por las convulsiones anóxicas manufacturer.Reflex vs contención de la respiración deletrea los estándares y las muestras se incubaron con un anticuerpo TNF-α recubrimiento de una placa de microtitulación de 96 pocillos. Los pocillos se lavaron con tampón y después se incubaron con anticuerpo anti-TNF-α conjugado con peroxidasa de rábano picante durante 2 h. Esto se lavó de distancia y un color amarillo-pardo se desarrolló en presencia de tetrametil bencidina sustrato cromógeno. La intensidad del color se midió en un lector de bio-cinética (instrumentos Bio-tek inc., Winooski, VT, EE.UU.) mediante la lectura de la absorbancia a 450 nm con una longitud de onda de corrección de 570 nm. Se compararon las muestras contra la curva estándar para determinar la cantidad de TNF-α presente. Todas las muestras se procesaron por duplicado. El límite inferior de sensibilidad para TNF-α mediante este ensayo fue de 5 pg / ml.Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto los coeficientes intra-ensayo e inter-ensayo de variación fueron 5,1% y 9,7%, respectivamente.

La medición de la 6-ceto-PGF 1α se basa en una técnica de unión competitiva en el que 1α presente 6-ceto-PGF en una muestra compite con una cantidad fija de alcalina 6-ceto-PGF 1α marcado con fosfatasa para sitios en un anticuerpo policlonal de oveja anticuerpos (kits 1? 6-ceto-PGF, sistemas de RD, Minneapolis, MN, EE.UU.). Durante la incubación, el anticuerpo policlonal se hizo unido al anticuerpo anti-oveja de burro revestido sobre la microplaca. Después de un lavado para eliminar el exceso de conjugados y muestras no unidos, se añadió una solución de sustrato a los pocillos para determinar la actividad de la enzima unida. El desarrollo de color se detuvo y se leyó la absorbancia a 405 mm en un lector de bio-cinética (instrumentos Bio-tek inc., Winooski, VT, EE.UU.).Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto la intensidad del color era inversamente proporcional a la concentración de 6-ceto-PGF 1α en la muestra. Todas las muestras se procesaron por duplicado. El límite inferior de la sensibilidad para la 6-ceto-PGF 1α mediante este ensayo fue de 1,4 pg / ml.

Se determinó los niveles plasmáticos de ALT, bilirrubina total y la creatinina mediante el ensayo colorimétrico con un sistemas clínicos 700 analizador (Beckman Instruments, Fullerton, CA, EE.UU.).

DISCUSIÓN

Con respecto a las relaciones entre el hígado y los derivados del ácido araquidónico, en la última década se ha aprendido mucho entre las interacciones de hígado y prostaglandinas (PGs) en condiciones normales y patológicas. Sin embargo, el rompecabezas está lejos de ser completa. Fisiológicamente, el hígado sintetiza todos los metabolitos principales de la cascada de araquidonato, incluyendo pgs.Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto se ha encontrado que pgs están implicados en diversos procesos fisiológicos en el hígado, incluyendo vasorregulación, la agregación plaquetaria y la mediación de la inflamación [33]. Como dijimos anteriormente, algunos estudios sugieren que pgs podrían proteger el hígado contra el daño por una amplia variedad de toxinas (tetracloruro de carbono, acetaminofeno, galactosamina, alcohol), hipoxia, isquemia y lesión inmune [15- 23]. Aunque el mecanismo preciso que subyace a los efectos citoprotectores de pgs en lesión hepática aguda queda por definir con precisión, puede estar relacionado con la reducción de la vasoconstricción con hipoxia tisular, la peroxidación de lípidos, y la liberación de citoquinas inflamatorias o factores citotóxicos [34- 36].Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto de acuerdo con estudios anteriores [15 a 23], nuestro estudio mostró que la inhibición de PGI2 por indometacina durante la lesión hepática aguda podría agravar el daño hepático. Además, este es el primer estudio que demostró que la administración de indometacina podría resultar en efectos perjudiciales sobre la encefalopatía en ratas con insuficiencia hepática fulminante TAA-inducida. Este hallazgo fue similar a la inhibición de NO en nuestra investigación anterior [14] lo que sugiere que el mantenimiento de la oxigenación del tejido por los vasodilatadores es importante en la insuficiencia hepática fulminante. Además, la evidencia de estudios en animales sugiere la administración de indometacina podría afectar a la neurotransmisión y las concentraciones de neuropéptidos en el cerebro [37- 39] .Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto ya que nuestro estudio no tenían datos sobre las cuestiones antes mencionadas, es difícil saber si los efectos nocivos de la inyección de indometacina sobre la encefalopatía pueden ser parcialmente atribuido a este y se justifican estudios adicionales.

Fisiológicamente, TNF-α se ha encontrado para ser un mediador péptido liberado por las células mononucleares de la activación por la endotoxina, la lesión de tejidos y células tumorales [40]. El metabolismo de TNF-α se encuentra en el hígado después de que se une a un receptor específico [41]. Por lo tanto, los niveles plasmáticos de TNF-α, junto con la bilirrubina sérica, podrían considerarse como un índice para evaluar el grado de daño hepatocelular y necrosis del tejido.

La clasificación de la encefalopatía hepática es crucial en el campo de la investigación para las convulsiones anóxicas factors.Reflex patogénicos relacionados causalmente vs contención de la respiración hechizos diferentes pruebas como la prueba de equilibrio, la córnea, sobresalto auditivo, y se han utilizado reflejos de enderezamiento pero la interpretación de estas pruebas puede ser subjetiva y no puede ser cuantificado. Por lo tanto, se aplicó un sistema de puntuación mecánica en el presente estudio. Estas pruebas son de gran beneficio en el seguimiento de los cambios de menor importancia en la conducta motivada. Sobre la base de la interrupción consecutiva de los rayos infrarrojos de vigilancia, podríamos diferenciar no ambulatorio (arañazos, roer) de los movimientos ambulatorios. La fila adicional de las células de infrarrojos por encima del plano nos puede proporcionar más información relativa a los movimientos hacia la dirección vertical. En el estudio actual, el intervalo de tiempo desde la primera dosis de la administración TAA a la medición de los recuentos de motor se fijó (72 h) .Reflex convulsiones anóxicas vs contención de la respiración deletrea la ventaja de este modelo es que puede proporcionar una ventana terapéutica para el tratamiento modalidades.

actos indometacina mediante la inhibición de la ciclooxigenasa (COX), la enzima limitante de la velocidad en la conversión metabólica de los ácidos araquidónico en pgs. Dos isoformas de la COX se han identificado [42] y ambos pueden ser inhibida por la indometacina. COX-1 se expresa constitutivamente en la mayoría de los tejidos y desempeña una función importante en la protección de la mucosa gástrica y el mantenimiento de la homeostasis fisiológica. COX-2 se cree que es la enzima inducida en los estados inflamatorios y la tumorigénesis. Recientemente, se demostró la intervención de los inhibidores selectivos de la COX-2 para preservar la eficacia antiinflamatoria de los fármacos antiinflamatorios no esteroides (AINE) y para lograr una mayor seguridad que los AINE tradicionales [43- 45] .Reflex convulsiones anóxicas vs contención de la respiración lo explica se desconoce si el uso de inhibidores selectivos de la COX-2 puede tener diferentes efectos sobre la encefalopatía hepática diferente a efecto perjudicial y este tema merece más evaluaciones.

Resultados de los ensayos clínicos preliminares utilizando pgs como agentes terapéuticos en pacientes con lesión hepática aguda grave han sido alentadores [46]. Sin embargo, la mayoría de estos ensayos fueron la falta de grupos de control. Para aceptar que PGS como un tratamiento estandarizado en algunas formas de daño hepático, todavía hay mucho que aprender sobre los mecanismos íntimos responsables del efecto hepatoprotector. Reconocemos que este estudio no puede ser 100% extrapolarse a pacientes con formas agudas o crónicas de la encefalopatía hepática en condiciones de hígado insufficiency.Reflex convulsiones anóxicas vs espasmos del llanto sin embargo, queremos señalar que el uso de AINE en pacientes que sufren de potencial encefalopatía hepática debe ser estrechamente vigilado.

En resumen, la administración de indometacina crónica tenía efectos perjudiciales sobre la gravedad de la encefalopatía en ratas tratadas-TAA y este fenómeno puede atribuirse en parte a la agravación de la lesión hepática. Es posible que la inhibición de prostaciclina puede afectar la neurotransmisión, la microcirculación cerebral, o cambios de la permeabilidad-barrera hematoencefálica. Sin embargo, los mecanismos responsables detalladas permanecieron no se han dilucidado. Nuestro estudio sugiere que la PGI2 puede proporcionar un papel protector en el desarrollo de insuficiencia hepática fulminante.